ELISACalc是一款回归和拟合数据的计算程序,能够用来计算直线回归、二次三次曲线回归、四参数曲线回归等。建议使用四参数回归曲线。ELISACalc软件与CurveExpert相比较,能选取的拟合模型种类较少,优点是操作简单,可以结合excel表格处理数据方便复制粘贴,计算大批量数据时有明显优势。
绘制方法如下:
1、在EXCEL表格中整理一组包括标曲和样本数据。
标准品 | 样本OD值 | |||
浓度pg/ml | OD值 | |||
0 | 0.0323 | 0.5227 | 0.5287 | 0.6105 |
156 | 0.1004 | 0.6302 | 0.6404 | 0.875 |
312 | 0.2003 | 0.4723 | 0.4829 | 0.4271 |
625 | 0.3464 | 0.4992 | 0.5065 | 0.9242 |
1250 | 0.5472 | 0.6473 | 0.6524 | 1.2026 |
2500 | 0.8945 | 0.4999 | 0.5069 | 0.8086 |
5000 | 1.3647 | 1.2535 | 1.2665 | 0.9042 |
10000 | 1.9448 | 1.5922 | 1.5855 | 0.8102 |
2、打开软件ELISACalc,复制表格中底色填充为粉色的数据,点击软件中的“粘贴”按钮,如图:
3、左上角优先选择四参数拟合曲线,点击“回归/拟合”模型,得到如下曲线图:
4、曲线应为平滑上升趋势,r2值越接近 1 拟合度越好。如果四参数模型不理想可以换成其他的模型。依次点击“回归方程”“复制”,可以把方程粘贴到表格中。
5、点击“由Y计算X”,复制表格中的样本吸光值即底色为黄色的数据,在软件中点击“粘贴”“计算”。即可得到对应的样本蛋白浓度值。
6、点击“复制”,即可把得到的浓度值粘贴到表格中。整理数据,再乘以稀释倍数,得到对应样本蛋白最终浓度值。
ELISACalc软件与CurveExpert相比较,能选取的拟合模型种类较少,优点是操作简单,可以结合excel表格处理数据方便复制粘贴,计算大批量数据时有明显优势。
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